Токсикологическая характеристика регуляторов роста растений — производных n-оксид пиридина

Для прогнозирования токсичности производных пиридина и N-оксид пиридина по физико-химическим свойствам использованы величины ЛД50 для крыс и мышей, их физико-химические параметры — Мм, Тпл., Ткип., Ро / у. Коэффициенты Ро / в рассчитывали по фрагментарными константами Реккера (А. Альберт, 1989), другие физико-химические свойства веществ приведены по данным Ю. И. Чумакова (1965). В расчетах использованы ЛД50 производных пиридина по данным литературы (Ю. И. Чумаков, 1965; Н. В. Лазарев, Э. Н. Левина, 1976; А. В. Павлов, 1986). Корреляционный и регрессионный анализ проводили по методам многомерной статистики с использованием пакета «Statgraphics» версии 3.0. Исследована хроническая токсичность для инфузорий 6 производных N-оксид пиридина: Ивин (N-оксид-2,6-диметилпиридина), прикрепленные (аква-N-оксид-2-метилпиридин-марганец-2-хлорид) , Ди (N-оксид-2-метилпиридин) цинк (II) хлорида (тетран), Ди (N-оксид-2-метилпиридин) цинк (II) йодида, Ди (N-оксид-2-метилпиридин) бурштинату N-оксид-2-метилпиридина протяжении 96 часов в концентрациях 10-2 М — 10-28 М. Определяли численность, морфологические изменения и гибель клеток в лаг-фазе (24 ч.), логарифмической фазе (48 ч .), стационарной фазе роста (72 и 96 ч.). токсикодинамики при субхроническое пероральной действия РРР исследована на крысах самках Wistar с восходящей массой тела 120 г в течение 6 месяцев (по воздействию Ивин и прикрепленные) и 3 месяцев (по воздействию тетран). И он вводили в дозах — 13 1,3, 0,13, 0,013 мг / кг, прикрепленные и тетран — 30, 3, 0,3, 0,03 мг / кг массы тела (соответственно 1/100, 1/1000, 1/10000, 1/100000 от ЛД50).
Врачиха

Проводили клиническое обследование, регистрировали массу и прирост массы тела крыс. Поскольку печень содержит значительное количество нуклеиновых кислот (НК) и является местом синтеза белков плазмы (Дж. Дэвидсон, 1976), то в тканях печени крыс определяли содержание ДНК и РНК методом Р. Цанева и Г. Г. Маркова (Э. Б. Сквирская, А. П. Чепинова, 1964), белка в ткани печени — по методу А. Н. Lowry et. al. (1951) и плазме крови — биуретовым методом (А. Кочетов, 1980), фракции белков сыворотки крови — методом электрофореза на бумаге (Р. П. Виноградова и др., 1977). Активность ферментов переаминирования аминокислот — аланинаминотрансферазы (КФ 2.6.1.2.) И аспартатаминотрасферазы (КФ 2.6.1.1.) Определяли по методу S. Reitman, S. Frankel (1957). Известно, что в результате распада белков образуются конечные продукты азотистого обмена. Наибольшую фракцию остаточного азота составляют мочевина, креатин и креатинин (Д. Л. Фердман, 1966). Содержание мочевины в плазме крови и мочи определяли по стандартным набором Биотест-Лахема, креатинина — методом Поннери, содержание белка в моче — по пробе с сульфасалициловою кислотой (В. В. Меньшиков, 1987). Влияние РРР на митотическую активность клеток костного мозга крыс оценивали по митотическим индексом (Руководство по краткосрочным тестам для выявление мутагенных и канцерогенных химических веществ, 1989). Для дифференциации токсических эффектов исследовали ЭПР-спектры в тканях печени крыс методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) в условиях низкотемпературной стабилизации в жидком азоте (J. Hashimoto et. Al., 1962). Исследования проводились на ЭПР-спектрометре фирмы «Вариан» Е-109 (США) за консультативной помощью научного сотрудника С. Г. Шандренко. Количественная оценка предоставлена по амплитуде ЭПР-сигнала (g-фактора), характеризующий содержание цитохрома Р-450, свободных радикалов (ВР), железо-серных белков (ЗСБ) и NO. Известно, что в результате нарушения сбалансированного перекисного окисления липидов (ПОЛ), могут накапливаться токсические продукты, меняться проницательность мембран и активность мембраносвязанных ферментов, и приводит к нарушению их структуры и функции (Б. А. цыпленок, 1988; А. А. Болдырев, 1990; Л. Б. Бондаренко, В. Н. Коваленко, 2000). Состояние мембран митохондрий гепатоцитов оценивали по следующим показателям: ПОЛ, что определяли по содержанию малонового диальдегида — МДА (Г. Г. Гацко, Л. М. Мажум, Е. А. Позняков, 1982); пассивное набухания митохондрий — за изменением светорассеяния суспензии митохондрий в 0,25 М и 0,07 М растворах сахарозы при длине волны 520 нм (А. В. Каргаполов, 1979); активность сукцинатдегидрогеназы — СДГ (К. Ф. 1.3.99.1) — по реакции окисления янтарной кислоты в фумаровую, цитохромоксидазы — ЦО (К. Ф.1.9.3.1) — по методу Cooperstein S., Losarnov (Р. С. Кривченков, 1977 ), содержание белка — по методу А. Н. Lowry et. al. (1951). Статистическую обработку результатов исследований проведено на микро-ЭВМ (А. Шевченко и др., 1987; Лапач С. Н., Губенко А. В., Бабич П. Н., 2002). Определяли среднюю арифметическую (Х), погрешность репрезентативности (m), критерий Стьюдента (t), достоверность данных (Р). Результаты и обсуждение. Токсические свойства производных N-оксид пиридина. Величины токсичности производных N-оксид пиридина для лабораторных животных приведены в табл. 1. Установлено, что по параметрам острой пероральной токсичности для крыс и мышей изучены производные N-оксид пиридина, их комплексы с органическими кислотами и солями относятся к 3 классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76). Внутривидовая вариабельность острой токсичности исследованных РРР для крыс — около 3, мышей — 10. Мыши более чувствительны, чем крысы в N-оксид пиридина, комплексов производных N-оксид пиридина с протонодонорамы (особенно при наличии в их составе щавелевой кислоты) и в структуре которых находятся металлы и галогеноводороды. Выраженной видовой чувствительности не выявлено, за исключением комплекса N-оксид-2-метилпиридина с щавелевой кислотой (КВЧ = 3,59). КВЧ для производных N-оксид пиридина составляет 1,09 — 2,05, для их комплексов с протонодонорамы — 1,27 — 3,59. Кумулятивный эффект у крыс слабо выражен. Наибольший Икуми. обнаружен в N-оксид пиридина и его комплекса с муравьиной кислотой, комплексов N-оксид-2-метилпиридина и N-оксид-2,6-диметилпиридина с щавелевой кислотой (0,32; 0,31; 0,31; 0,29 соответственно). По сравнению с N-оксид пиридином в его метательных производных кумулятивный эффект менее выражен (Икуми. 0 — 0,19). У мышей кумулятивный эффект N-оксид пиридина уменьшается в 2 раза (Икуми. 0,17), N-оксид-2-метилпиридина, N-оксид-2,6-диметилпиридина — умеренно выраженный (Икуми. 0,37 и 0,54 соответственно). Таблица 1 Химическое название, физико-химические свойства и токсичность производных пиридина и N-оксид пиридина

Химическое название Мм Ткип / пл Ро / в ЛД50, мг / кг, крысы / мыши ЛД50 мг / кг *
1 Пиридин 79,1 115,3 / -41,6 0,75 200 / 400 733
2 2-метилпиридин 93,1 129,4 / -66,5 1,27 790/617 946
3 2,6-диметилпиридина 107, 2 144,1 / -6,1 1,79 1150/1050 1296
4 2,5 диметилпиридина 107,2 157 / — 1,79 2000/1550 1630
5 2-метил-5-етилпиридин 121,2 176 / — 2,32 1460/1680 1709
6 6-трихлорметил-2-хлорпиридин 230,9  — / 62 3,43 1070/700 1020
7 2-трихлорметил-3,4,5-трихлорпиридин 299,78  — / 101 5,47 1780/1600 1661
8 2-трихлорметил-3,4,5,6-тетрахлорпиридин 339,22  — / 60 5,8 1840/1500 1599
9 б-аминопиридин 94,1 204/56 -0, 27 514/214 507
10 4-аминопиридин 94,1 180/159 -0,27  — / 20 125
11 4-амино-3,5дихлор — 2-трихлорметилпиридин 280,3  — / 130 3,17 1180/650 976
12 4-амино-3,5,6-трихлор-2-трихлорметилпиридин 314,8  — / 136 4,02 1500/770 1079
13 пиридона 178,2  — / 238 1,5 1900/3100 2454
14 N-оксид пиридин 95 70/140 0,32 4075/2920 3097
15 N-оксид -2-метилпиридин 109 47/123 0,84 1500/1163 1178
16 N-оксид-2,6-диметил пиридин 123 219/117 1,36 1300/1425 1026
17 4 нитро-N-оксид пиридин 140,1 156 / — 0,08 110/310 94
18 N-оксид пиридин с муравьиной кислотой 141 20 / — -0,45 2000/3150 1556
19 N-оксид-2-метилпиридин с муравьиной кислотой 155 19 / — 0,07 1426/925 1122
20 N-оксид-2,6-диметилпиридина с муравьиной кислотой 169 21 / — 0,59 1700/2275 1330
21 N-оксид пиридин с щавелевой кислотой 185 76 / — -1,56 2000/875 1556
22 N-оксид-2-метилпиридин с щавелевой кислотой 199 76 / — -1,04 1725/480 1349
23 N-оксид-2,6-диметилпиридина с щавелевой кислотой 213 77 / — -0,52 1350/782 1064